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## L414-5KR 操作规程
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检验依据：QAS-ZJ414-5KR-05
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### 1. 相关物质及含量
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#### 1.1. 色谱条件
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色谱柱：C18, 250mm x 4.6mm x 5um
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流速：1.0 mL/min
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波长：210 nm (相关物质) / 225 nm (含量)
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运行时间：40 min
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后运行时间：13 min
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柱温：25 °C
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进样量：5 uL
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流动相A：0.1% 磷酸水溶液
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流动相B：甲醇
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梯度程序：
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| 时间(min) | A% | B% |
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| :-------: | :---: | :---: |
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| 0 | 50 | 50 |
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| 10 | 25 | 75 |
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| 18 | 25 | 75 |
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| 25 | 5 | 95 |
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| 40 | 5 | 95 |
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#### 1.2. 样品配置
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**溶剂**：甲醇
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**杂质储备液 1**：称取 15mg L414-3KR 于 250mL 容量瓶中，定容。
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**杂质储备液 2**：称取 10mg L414-4KR 于 100mL 容量瓶中，定容。
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**杂质储备液 3**：称取 10mg L414-5IM 于 100mL 容量瓶中，定容。
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**LOQ 溶液**：移取
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0.5mL 杂质储备液 1
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1.0mL 杂质储备液 2
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1.0mL 杂质储备液 3
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于 100mL 容量瓶中，定容。
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**SST 溶液**：称取 10mg 样品于 10mL 容量瓶中，加入
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0.5mL 杂质储备液 1
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0.2mL 杂质储备液 2
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1.0mL 杂质储备液 3
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定容。
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**样品溶液**：称取 25mg 样品（两份）于 25mL 容量瓶中，定容。
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**对照品溶液**：称取 25mg L414-5KR 对照品（两份）于 25mL 容量瓶中，定容。
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#### 1.3. 容量瓶用量
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| 规格(mL) | 数量 |
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| :------: | :---: |
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| 250 | 1 |
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| 100 | 3 |
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| 25 | 4 |
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| 10 | 1 |
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每多一批样品则多加 2 个 25mL 容量瓶
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#### 1.4. 进样顺序
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+ 空白
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+ LOQ 溶液
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+ SST 溶液
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+ 对照品溶液 1
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+ 样品溶液 1
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+ 样品溶液 2
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+ 对照品溶液 2
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#### 1.5. 系统适用性要求
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+ 样品溶液图谱中主峰保留时间于对照品一致
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+ LOQ 溶液图谱中 L414-3KR、L414-4KR、L414-5IM 的 S/N ≥ 10
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+ SST 溶液图谱中主峰的理论塔板数 ≥ 2000
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+ SST 溶液图谱中主峰的拖尾因子 ≤ 2.0
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+ SST 溶液图谱中 L414-3KR、L414-4KR、L414-5IM 与主峰之间的分离度 ≥ 1.0
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+ 对照品溶液 1 前 5 针主峰峰面积 RSD ≤ 1.0%
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+ 对照品溶液 1 与 对照品溶液 2 的 f 值之比在 99% - 101%
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#### 1.6. 标准要求
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+ 含量 98% - 102%
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+ L414-3KR ≤ 0.3%
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+ L414-4KR ≤ 0.2%
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+ L414-5IM ≤ 1.0%
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+ 最大未知杂质 ≤ 0.50%
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+ 杂质总量 ≤ 2.0%
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+ 纯度 ≥ 98%
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### 2. 手性纯度
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#### 2.1. 色谱条件
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色谱柱：AD-H, 250mm x 4.6mm x 5um
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流速：1.0 mL/min
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波长：210 nm
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运行时间：30 min
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柱温：25 °C
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进样量：5 uL
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流动相：正己烷:0.2%三氟乙酸乙醇=90:10
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#### 2.2. 样品配置
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**溶剂**：乙醇
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**杂质储备液**：称取 10mg L414-5S 异构体对照品于 100mL 容量瓶中，定容。
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**LOQ 溶液**：移取 50uL 杂质储备液于 10mL 容量瓶中，定容。
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**SST 溶液**：称取 10mg 样品于 10mL 容量瓶中，加入 0.5mL 杂质储备液，定容。
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**样品溶液**：称取 10mg 样品于 10mL 容量瓶中，定容。
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#### 2.3. 容量瓶用量
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| 规格(mL) | 数量 |
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| :------: | :---: |
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| 100 | 1 |
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| 10 | 3 |
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每多一批样品则多加 1 个 10mL 容量瓶
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#### 2.4. 进样顺序
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+ 空白
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+ LOQ 溶液
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+ SST 溶液
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+ 样品溶液
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#### 2.5. 系统适用性要求
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+ LOQ 溶液图谱中 L414-5S 异构体的 S/N ≥ 10
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+ SST 溶液图谱中 L414-5KR 的理论塔板数 > 2000
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+ SST 溶液图谱中 L414-5KR 的拖尾因子 < 2.0
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+ SST 溶液图谱中 L414-5S 与 L414-5KR 的分离度 ≥ 1.5
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#### 2.6. 标准要求
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+ 手性纯度 ≥ 99.5%
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### 3. 干燥失重
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#### 3.1. 条件
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50 °C，抽真空
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#### 3.2. 标准要求
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干燥失重 ≤ 0.5%
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